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如何选购多功能微孔板读数仪

一、滤片Vs光栅

滤光片的透光率一般为70%,相对于光栅的透光率(一般为30%)更高,因此具有相对更高的检测灵敏度;但是受限于滤片的波长和数量限制。

光栅技术由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,再把杂散光过滤一遍,达到基本与纯粹的滤光片系统一致的杂光率,又同时具有了波长选择的灵活性。

双光栅式,通过两次光栅滤光,杂光率降到了10-6,但需要增加带宽来增加光强,提高灵敏度,因此带宽不能过低。

 

二、杂光率&波长准确性

杂光率指的就是光源通过光栅后,得到的光线中,“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例,表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性,无论使用滤光片还是光栅,杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。由于此类杂光是非特异的,而且会直接进入最后的检测器,部分检测器还存在放大效应,所以杂光率的干扰也会被指数级放大,带来随机误差。

光栅的另一个重要指标就是波长选择的准确性。一组性能优良的光栅系统,他的波长选择准确性应该是在±0.5~1nm之间。波长偏离过大有时就会影响到最终结果的准确性。

 

三、自动增益校正功能

由于检测器的光电倍增管的动态范围只有3-4个数量级,因此在固定电压下, 实际荧光或化学发光的检测动态范围只有3-4个数量级。通过增益调节技术,则可以通过选择不同的高低电压,获得更广泛的数据。由于实验都具有一定的未知性,每次检测时样品的发光程度不一定能很好的预测,如果低浓度样品选择了低电压,或者高浓度样品选择了高电压增益,则可能出现部分信号不在检测范围内或者PMT过饱和的现象,导致实验无法获得有效结果。如果仪器具有自动增益调节技术,那么读数的成功率可以大大提升。

 

四、灵敏度参数Vs整机认证

灵敏度涉及了整个光路系统的设计和选料,很难说某一个部件会起决定性作用。但是关于灵敏度的定义和检测标准,每个厂家都有各自的描述,参数不一定能很好的说明问题。但是如果能提供一个大家认可的第三方认证,则更有说服力。 比较常见的是发光检测领域里面的Promega公司DLReady认证,荧光检测领域的Thermo Scientific公司的LanthaScreen系列认证、Cisbio公司的HTRF认证、BellBrook实验室的Transcreener认证等等。这些认证通常包括:检测方法是否能用,灵敏度、线性范围、孔间干扰等是否满足要求等等。如果机器拥有相关的认证,就可以说明该机器在一定程度上能够较好地满足类似检测的各种需求,远比单单比较一个灵敏度参数更能说明问题。

 

五、各种功能

多功能微孔板读数仪都有多个模块多种功能,基本都是根据应用进行选择,比如荧光顶读和底读(用于贴壁细胞的检测)、自动分液器(如闪光型化学发光检测必须要加完样立即检测,必须配自动分液器)、气体模块(活细胞连续在线观测)。


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